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首届(2016)中国毛兔产业种业发展大会.doc
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长毛兔养殖场兔病生物安全综防新技术

动物生物安全的概念是强调动物饲养环境的控制,其核心是隔离、消毒和预防等技术的综合应用,防止病原入侵动物群体,使动物处于最佳生产状态,同时减少病原和药物残留,在确保畜产品的安全的同时,也保障人类的健康。长毛兔养殖场的疾病生物安全综合防治新技术是一项复杂的工程,包括检疫诊断、消毒、疫苗防疫注射、药物治疗、隔离、病死兔及粪便处理等。现根据浙江省嵊州、新昌、宁波等部分兔场的实际情况,研制出了一套长毛兔养殖场的疾病生物安全综合防治新技术,总结如下。

1.流行病学调查

通过流行病学调查,明确常见多发病种类及病因,探明其发病特点和规律,这是兔场疫病防治的首要任务。通过对长毛兔养殖地区的长毛兔各年龄段兔疫病的跟踪调查,调查发病年龄、发病率、死亡率、不同季节的发病情况,发病与饲养管理、环境关系,观察临床症状和病理变化,明确兔病毒性出血症、腹泻病、腹胀病、球虫病、皮肤真菌病、传染性鼻炎等主要疫病的发病规律,为疫病的诊断提供依据,并为采取积极有效的防治措施提供帮助。

2.病原分离鉴定

病原分离鉴定是兔病临床诊断的重要一环,为疾病的治疗提供充分的科学依据,在这一步过程中,对分离到的病原通过形态特征、生长和生化特性及进一步PCR等分子生物学手段进行病原鉴定,明确其病原特性,结合药敏特性试验,选用敏感的药物进行临床治疗,提高治疗效果。

1)对呼吸道病可采集病兔鼻腔分泌物、气管和肺脏,分别接种于麦康凯、TSA和鲜血琼脂培养基,置37恒温箱培养24h,观察菌落形态,将可疑菌落进行纯化扩大培养。挑取单个菌落涂片,进行革兰氏染色、镜检,观察着色情况及细菌形态,筛选出可疑的致病菌;将纯培养物接种于各种生化培养基上,置37温箱内培养23天观察结果,根据生化培养结果,鉴定出致病菌。根据已有的经验,呼吸道的主要病原菌有波氏杆菌、巴氏杆菌、绿脓杆菌、葡萄球菌等,其中波氏的感染比例最高。分离到的病原有条件的可进一步经小白鼠、豚鼠及家兔进行人工感染发病试验,明确其致病性。

2)消化道病主要病原微生物分离鉴定,其病原菌主要通过解剖后,从病死兔的肝脏、心血、肠系膜淋巴结、以及直接在肠道的病变部位分离原,分别在血平板、麦康凯琼脂,TSALB以及马丁琼脂等培养基中分离培养,通过形态观察、生理生化特性,以及进一步的PCR等分子生物学技术手段,鉴定明确其病原菌的种类,消化道的常见病原菌有:致病性埃希氏大肠杆菌、魏氏梭菌、螺旋形梭状芽胞杆菌、嗜水气单胞杆菌、蜡样芽胞杆菌和绿脓杆菌等,病原致病菌比较复杂,象大肠杆菌、魏氏梭菌以及嗜水气单胞杆菌等很多是毒素在致病的过程中扮演重要的角色,因此对分离的病原菌有必要做一下致病性试验,以进一步明确其致病力。

3皮肤真菌病的病原分离鉴定:对感染兔的病原真菌分离鉴定,从患有皮肤真菌病的兔表皮上,去掉患部周围的毛,用酒精棉花消毒,然后用镊子或铂金耳挑取患部皮肤,接种于沙保氏琼脂、马丁肉汤琼脂或TSA培养基中,于28湿度75%恒温箱中培养,25天后观察培养结果,对长出的菌落纯化后,进一步进行形态鉴定,通过其菌落形态、色泽,菌丝特征、孢子的多少及大小,有条件的可进一步进行PCR等分子生物学技术手段鉴定。有必要时再作人工发病试验,一般选用60日龄左右健康兔,剪去背侧及耳廓背2cm×3cm的面积的被毛,洗净,用灭菌细纱纸轻磨伤,消毒,用病料作皮肤擦伤感染试验,取TSA培养基上培养2天的菌落病料,用棉签刮取培养物涂擦于处理的部位,每天观察感染部位变化情况,根据感染结果确定其致病性。

4)其它病原,如兔病毒性出血症,则除了通过流行病学调查和必不可少的临床病理解剖外,根据典型的病理特征进行诊断,再加上采用人“O”型红血球的玻片凝集试验进行确诊;对球虫病进行解剖并取典型病变兔的肠道内容物观察其球虫卵囊的数量多少及种类,以诊断其感染与否或严重的程度。

5)分离病原的药敏特性试验:对呼吸道、消化道等病兔中分离的部分病原作进一步的药敏试验,根据药敏试验结果,用敏感的药物对发病的兔场进行临床治疗,可以收到更好的治疗效果。

3.病兔治疗

对患病兔及时进行治疗,既减少死亡所造成的经济损失,又可控制传染病的流行。治疗的前提是先确诊,搞清是什么病,做到对症用药,就会收到满意的效果,可避免人工和药物的浪费,延误治疗时机。

如前所述,在治疗前有必要将分离到的细菌进行药敏试验,再根据药繁试验结果选择敏感的药物,治疗更具有针对性,提高治疗效果,降低药物残留;治疗时应严格掌握用药剂量和疗程。长期使用低浓度药品不但疗效差,而且还容易产生耐药性。像球虫一旦出现耐药虫株,可耐受使用浓度的48倍剂量,而且会长期保持这种耐药性,并可世代相传。因此掌握科学用药、科学治疗,降低治疗成本,提高治疗效果。

4.免疫预防

众所周知,免疫接种是控制传染病的一种卓有成效的手段,牢记防重于治的原则,制定了合理的免疫程序,并严格执行,提高防疫效果。参考的免疫程序如下:

3045日龄:兔瘟-大肠杆菌二联苗,首免加倍;

6070日龄:兔瘟-大肠杆菌二联苗(或兔瘟-巴氏杆菌二联苗),二免;

以后每隔5个月免疫一次;

种兔每5个月免疫一次,针对仔幼兔发生兔出血症的趋势,剂量应加倍;

鼻炎严重兔场建议用兔瘟-巴氏杆菌-波氏杆菌三联苗。

球虫病预防:3090日龄的兔,用克球粉、氯苯胍、迪克珠痢等交替预防使用。

免疫接种是否切实有效取决于许多因素,一般情况下,免疫接种作为控制某一特定疾病的预防手段,其选择使用的免疫时间、剂量及免疫次数都是在实际应用中测定了其抗体动态变化规律的情况下作出科学的推荐,因此具体的兔场可根据兔场的实际情况作出相应微调,以取得更好的免疫效果。

免疫预防又分常规免疫接种和发生疫病时的紧急预防接种,如前述推荐的为常规免疫,是兔场一般情况下实施的。但在兔场发生某些烈性传染病时,如发生兔出血症时,在明确诊断的情况下应紧急预防接种,剂量应加大一倍以上,以达到在短期内有效控制疫病和发生和发展,一般35天可以有效控制疫情。

5.病兔的隔离

兔场一旦发生疫病,应尽快采取隔离措施,将病兔、可疑病兔与健康兔分群隔离饲养,及时控制和消灭传染源,从而中止传染病的流行,以达到消灭传染病的目的。如兔瘟,是一种急性烈性传染病,一旦发生,传播十分迅速,其死亡率相当高,如不及时采取有效措施,发病的兔场有可能全群覆没。这种病主要是接触传染,所以,如果将潜伏期兔和病兔出售,将带来严重后果,造成更大经济损失。再如疥癣病,皮肤真菌病等,其传播也很快,易消瘦,青幼兔的死亡率也较高,有的兔场甚至感染后会造成不可逆转的局面。因此对这些接触性传染病,作好隔离就显得十分重要。

在购进种兔时,进行隔离饲养观察,也显得十分重要,很多兔场由于没有做好这个工作,结果造成整个兔场感染慢性传染病,如皮肤真菌病、传染性鼻炎等,这些疾病一旦混群饲养,即会造成严重的不可弥补后果。正确的做法是,在购进种兔时,隔离饲养观察一个月,确认健康后再混群饲养。

6.淘汰病兔

对那些老弱病残和久治不愈的兔应予以坚决淘汰。因为这些带菌的病兔不但耗费饲料、药品、人工等,在经济上带来损失,而且成为病原的发源地,很难根除。事实证明,这种措施是必要的。这个措施也必须做得坚决,杜绝后患。需要采取这些的情况有:严重的呼吸道病兔,且久治不愈;严重的真菌病、坏死性脚皮炎等病兔。

7.病死兔及粪便处理

病死兔是主要的传染来源,死亡兔不要在兔舍内解剖,应在专门的解剖室内解剖;病死兔应远离兔舍挖坑深埋或焚烧处理。接触过的用具要进行消毒,工作人员手及鞋都应进行消毒,否则病菌将进一步扩散传播。

对于粪便处理,也应该特别注意,某些肠道疾病可通过粪尿传播,如球虫、大肠杆菌、沙门氏杆菌等,均可通过粪尿及排泄物污染饲料、饮用水和用具等,所以应将粪便堆积发酵处理,以便及时杀灭可能存在的病原。患球虫病兔的粪便中的卵囊称为未成熟卵囊,没有感染性,未成熟卵囊必须在2030℃的温度,即足够的温度和有氧气等存在的条件下,经过23天成熟形成孢子。未成熟卵囊经502小时、6015分钟、7535分钟,10012秒钟就可被杀死。粪便堆积发酵产生的热量和氨气可以将球虫卵囊和多数其他微生物杀死。

8.消 毒

消毒的目的是消灭外界病原微生物,减少污染。采用地面、空中、笼位立体消毒方式比较好。兔笼及产仔箱可用火焰消毒法,效果明显,可以烧掉粘附在兔笼上的兔毛及随之携带的病原,阻止进一步的污染和扩散。兔舍空间消毒可用百毒杀自上而下地喷雾消毒,浓度为14008mL/m3计算。也可用福尔马林熏蒸,20mL/m3加等量热水,或加高锰酸钾,密封10小时。但本药刺激性较大,宜在空栏情况下进行。地面用2%烧碱水、5%来苏尔等交替使用。兔场门口用1%烧碱水或生石灰粉,要经常更换。

我们曾对常年采取以上消毒措施兔场,测定用百毒杀消毒前后的兔舍空气中的含菌量变化,用马丁肉汤血琼脂平皿培养基培养,用经典的郭霍氏沉降平板法,每栋免舍用5个平皿,地面的四个角落及中央各置一个,揭盖暴露于空气中5分钟,盖上盖,37培养48小时,计数菌落,求得每个平皿的菌落数,按公式计算出每立方米空气的含菌量:平均菌落总数×1000÷1.9,结果见下表:

消毒前后空气含菌量变化(/m3)

药物

消毒前

4h

24h

48h

72h

百毒杀

19368

17503

11263

9579

7105

由表可知,消毒前细菌数为19368mL/m3,消毒后至72小时减少至7105mL/m3用药后空气含菌量呈直线下降,从所测定的时间范围内呈持续下降趋势,起到了良好的消毒作用,对有效控制疾病起到重要作用。

另外,消毒分为常规消毒和紧急消毒。常规消毒,指的是在没有发生疫病时应定期进行消毒,一般应根据兔场的具体情况,15-30天进行一次。紧急消毒,指的是在发生疫病时应采取紧急消毒措施,以随时消灭产生的病原。